Înțelegerea sfaturilor de pipetă de legare scăzută

1. Ce sunt sfaturi cu pipetă de legare scăzută?

Sfaturi cu pipetă de legare scăzută sunt consumabile de laborator concepute pentru pipete (pipete) care prezintă tratamente speciale de suprafață și/sau sunt fabricate din materiale specifice. Obiectivul lor de design principal este să reduceți semnificativ adsorbția și retenția eșantionului pe peretele interior al vârfului .

• Problemă de bază: Sfaturile stşiard de polipropilenă au suprafețe cu hidrofobicitate și sarcină inerente, ceea ce poate duce la adsorbția nespecifică a anumitor componente de probă, în special biomolecule (precum proteine, acizi nucleici) și soluții vâscoase.
• Soluţie: Sfaturile de legare scăzute modifică proprietățile de suprafață ale peretelui interior prin metode fizice sau chimice, ceea ce îl face mai hidrofil și mai inert, reducând astfel forțele de interacțiune între molecule și peretele vârfului.

2. Cum funcționează (tehnologii de tratare a suprafeței)

Efectul scăzut de legare este obținut în principal prin următoarele tehnologii:

• Aditivi polimerici speciali: Încorporând aditivi polimerici specifici (de exemplu, modificatori hidrofili) în materialul de bază din polipropilenă în timpul producției, oferind proprietăților de legare scăzută a corpului de vârf. Aceasta este metoda actuală și cea mai stabilă.
• Acoperiri de suprafață:
  • Acoperiri hidrofile: Aplicarea unei acoperiri hidrofile (de exemplu, anumite acoperiri polimerice) pe peretele interior pentru a crește umectabilitatea suprafeței, a reduce retenția lichidului și adsorbția proteinelor.
  • Acoperiri inerte: Aplicând acoperiri extrem de inerte (de exemplu, anumiți derivați de silan) pentru a reduce siturile active de suprafață și a minimiza adsorbția chimică.
• Tratamente speciale de suprafață: Modificarea proprietăților microstructurii și chimice ale suprafeței de polipropilenă prin metode fizice (de exemplu, tratament cu plasmă) sau gravură chimică pentru a crește hidrofilicitatea.
• Polipropilenă de puritate ultra-înaltă: Utilizarea materiei prime din polipropilenă cu conținut de impuritate extrem de scăzute pentru a reduce potențialele site -uri de adsorbție cauzate de impurități.

3. Avantaje și caracteristici cheie

• Minimizează pierderea eșantionului: Acesta este avantajul principal. Reduce semnificativ adsorbția și reținerea eșantioanelor prețioase, cu concentrare scăzută sau minute (de exemplu, proteine, ADN, ARN, enzime, anticorpi, suspensii celulare, reactivi vâscoși) pe peretele vârfului, asigurând pipetarea pipetării precizie şi recuperare .
• Îmbunătățește precizia și reproductibilitatea experimentală: Adsorbția redusă înseamnă mai multe volume de distribuire mai consistente, scăderea erorilor experimentale cauzate de reportajul eșantionului și îmbunătățirea rezultatului fiabilitate and reproductibilitate .
• Reduce riscul de contaminare încrucișată: Expulzarea lichidă mai completă și reziduurile de probă mai mici scad riscul de contaminare încrucișată atunci când pipetați secvențial diferite probe.
• Ideal pentru aplicații sensibile: Minimizează impactul asupra activității eșantionului, ceea ce le face în special adecvate pentru experimente sensibile la adsorbție în biologie moleculară, biologie celulară, proteomică, diagnostic, etc.
• Îmbunătățește umectabilitatea: De obicei, prezintă o mai bună hidrofilicitate, permițând lichidului să curgă mai lin în vârf, reducând aderarea la menisc și formarea cu bule, ceea ce duce la o operație de pipetare mai ușoară.

4. Aplicații cheie (ce experimente au nevoie în special de ele?)

Sfaturile de legare scăzute sunt foarte recomandate, aproape esențiale, pentru următoarele aplicații:

• Biologie moleculară:
  • PCR cu randament ridicat, qPCR, DDPCR: reduce pierderea ADN-ului/șablonului, asigurând eficiența amplificării și precizia cuantificării.
  • Purificarea acidului nucleic și prepararea bibliotecii: previne pierderea fragmentelor de ADN/ARN prețioase în timpul purificării.
  • Pregătirea eșantionului NGS: Pipetarea precisă a bibliotecilor minute este esențială.
• Cercetare proteică:
  • Testele de concentrație de proteine ​​(BCA, Bradford, etc.): previne adsorbția proteică care duce la subestimarea concentrației.
  • Teste de activitate enzimatică/cinetică: asigură o cantitate exactă a enzimei și evită pierderea activității.
  • Pregătirea eșantionului Western blot: pipetul precis al proteinelor în tampoane care conțin SDS sau agenți de reducere.
  • Purificarea proteinelor (de exemplu, colectarea fracției de cromatografie de afinitate): evită pierderea proteinei țintă.
• Cultura celulară și experimente conexe:
  • Pasaj/placare a liniilor de celule prețioase sau a celulelor primare: reduce pierderea de adeziune a celulelor în vârf.
  • Teste de viabilitate celulară: pipetarea precisă a suspensiilor și reactivilor celulari.
  • Transfecție: pipetarea precisă a ADN -ului, ARN, complexe de reactiv de transfecție.
• Diagnostic și testare clinică: ELISA, imuno -tehiluminescente, POCT: asigură volume precise de probe și reactivi, îmbunătățind sensibilitatea și precizia detectării.
• Soluții vâscoase sau predispuse la spumă: Glicerol, DMSO, soluții tensioactive, anumite tampoane: reduce retenția și reportajul, îmbunătățind precizia pipetului.
• Orice experiment care implică probe prețioase, minute sau care necesită o precizie ridicată și reproductibilitate.

5. Cum să alegeți vârful de pipetă de legare scăzut?

• Compatibilitate: Cerința principală este că ei necesitate Fii perfect compatibil cu marca și modelul tău de pipetă. Verificați întotdeauna listele de compatibilitate sau consultați ghidul producătorului înainte de a cumpăra.
• Certificări și calitate:
  • RNază certificată/DNază/fără pirogen: Crucial pentru biologia moleculară și experimentele de cultură celulară. Asigurați -vă o certificare fiabilă.
  • Certificat PCR fără inhibitori: Foarte important pentru aplicațiile PCR/QPCR.
  • Calitatea producției: Fabricarea de înaltă calitate asigură dimensiuni precise, formă constantă, absența burrilor și lipsa contaminării particulelor (gradul de curățenie). Alegeți mărci de renume.
• Nivel scăzut de performanță de legare: Performanța poate varia între mărci și serii. Acordați atenție datelor de performanță furnizate de producător (de exemplu, rapoarte de testare a reziduurilor de adsorbție proteică). Pentru aplicații extrem de solicitante (de exemplu, secvențiere cu o singură celulă, detectarea proteinelor din abundență ultra-scăzută), pot fi necesare sfaturi de legare scăzute de nivel superior.
• Ambalaj și sterilitate:
  • Format de ambalare: Rafinat (stivuit sau în vrac), bagat, filtrat (opțional). Alegeți ambalajele potrivite pentru fluxul dvs. de lucru și nevoile de automatizare.
  • Sfaturi filtrate: Dacă este necesară prevenirea contaminării aerosolului arborelui pipetei, alegeți sfaturi de legare scăzute cu filtre (sfaturi de filtru de legare scăzute). Filtrul în sine ar trebui să fie, de asemenea, o legătură scăzută.
  • Pre-sterilizat: Majoritatea experimentelor necesită sfaturi pre-sterilizate (de obicei iradiat gamma). Verificați metoda de sterilizare și nivelul de asigurare a sterilității (SAL). Sfaturile non-sterile sunt potrivite pentru unele aplicații non-critice sau dacă laboratorul își îndeplinește propria sterilizare.
• Eficiența costurilor: Sfaturile scăzute de legare sunt, în general, mai scumpe decât sfaturile standard. Evaluează eficiența costurilor în timp ce îndeplinesc cerințele de performanță. Nu faceți compromisuri cu privire la experimentele critice prin utilizarea sfaturilor standard pentru a economisi costuri, deoarece datele inexacte sau pierderea eșantionului poate duce la deșeuri mai mari.

6. Note de utilizare

• Atașament adecvat: Asigurați -vă că vârful este atașat în siguranță și perfect la pipetă fără lacune pentru a preveni scurgerea de aer și volumele inexacte.
• Pre-umezire: Pentru lichidele vâscoase sau volatile, pre-umezeala (aspirarea și distribuirea lichidului de câteva ori înainte de transferul real) poate îmbunătăți uneori în continuare precizia (chiar și cu sfaturi de legare scăzute). Urmați ghidurile de funcționare a pipetei.
• Evitați atingerea capetelor vârfului: Mențineți sterilitatea și preveniți contaminarea.
• Depozitare: Depozitați într -un loc răcoros și uscat departe de lumina directă a soarelui și praful. Rețineți data de expirare la ambalaj.