Cum să evitați neînțelegerile comune în utilizarea sfaturilor de pipetă cu legare mică?

Sfaturi cu pipetă de legare scăzută poate reduce semnificativ reziduurile de eșantion datorită proiectării lor hidrofobe de suprafață interioară și sunt deosebit de potrivite pentru manipularea reactivilor scumpi, lichide vâscoase sau eșantioane de urmă (cum ar fi proteine ​​și acizi nucleici). Cu toate acestea, dacă nu sunt operate corect, pot afecta în continuare exactitatea și repetabilitatea experimentului. Următoarea este o analiză a erorilor și soluțiilor comune utilizate în combinație cu specificațiile de operare de laborator:

Înțelegerea greșită 1: Ignorând pre-clătirea vârfului

Funcționare greșită: aspirați direct eșantionul și omiteți etapa de pre-clătire.

Impact: Deși vârfurile de pipetă cu legătură mică pot reduce reziduurile, pentru eșantioane precum solvenții serici, proteici sau organici, pereții lor interiori pot forma în continuare un film micro-lichid din cauza tensiunii de suprafață, rezultând un volum de pipet inițial scăzut.

Abordare corectă: Înainte de pipetarea formală, repetați descărcarea de aspirație de 2 până la 3 ori cu același eșantion pentru a forma un strat de film lichid stabil pe peretele interior al vârfului (cu excepția lichidelor cu temperatură ridicată/la temperaturi joase).

Înțelegerea greșită 2: Viteza de aspirație este prea rapidă sau unghiul este înclinat

Funcționare greșită: aspirați rapid lichidul sau pipeta este înclinată mai mult de 20 °.
Impact:

Pipetă prea rapid: bule sau aspirație din spate (lichidul se grăbește în pipetă și contaminează pistonul);
Pipetă înclinată: Modifică presiunea de suprafață lichidă, ceea ce duce la volumul de pipetare inexacte și creșterea volumului rezidual. Abordare corectă:
Pipetă încet și eliberează lent: funcționează la o viteză constantă și controlează viteza de eliberare a pistonului;
Țineți vertical: mențineți unghiul de înclinare ≤20 ° când vârful pipetei este scufundat în suprafața lichidului.
Înțelegerea greșită 3: Ignorarea diferențelor operaționale ale lichidelor vâscoase
Funcționare greșită: Utilizați aceeași viteză de pipet ca lichide obișnuite pentru probele de vâscozitate ridicată (cum ar fi glicerolul și suspensiile celulare).
Impact: lichidele vâscoase curg lent pe peretele interior al vârfului pipetei, iar descărcarea rapidă va provoca o creștere semnificativă a volumului rezidual, compensând avantajele proiectării scăzute de adsorbție.
Abordare corectă:

Extindeți timpul de imersiune: rămâneți pe suprafața lichidului timp de 1 secundă după ce aspirați înainte de a -l îndepărta și întrerupeți o secundă înainte de a apăsa a doua angrenaj pentru a sufla lichidul la descărcare;
Alegeți un vârf de pipetă cu gura largă: Pentru macromolecule sau probe de celule, utilizați un vârf de pipetă cu gura largă cu gura largă (cu 70% mai mare decât diafragma standard) pentru a reduce forța de forfecare.
Concepție greșită 4: lovind greu la instalarea vârfului
Funcționare greșită: lovirea în mod repetat a mânerului pipetei pentru a „strânge” vârful.
Efect: Impactul pe termen lung va purta componentele de etanșare a pipetei, va distruge etanșitatea și va provoca erori de scurgere sau volum.
Metodă corectă: Introduceți pipeta vertical în vârf, apăsați ușor și rotiți ușor la stânga și la dreapta pentru a se potrivi.

Concepție greșită 5: stocare incorectă sau reutilizare
Funcționare greșită:

Puneți pipeta plat când există lichid rezidual în vârf;
Reutilizați sfaturi de unică folosință pentru a economisi costuri. Impact:
Punerea unor cauze plate de flux de lichid pentru a coroda arcul pistonului;
Reutilizarea poate afecta precizia din cauza contaminării încrucișate sau a deformării structurale. Metoda corectă:
Aruncați vârful imediat după pipetare și agățați pipeta vertical;
Reutilizarea este strict interzisă, mai ales când vine vorba de experimente sensibile, cum ar fi PCR și izotopi.
Sfaturi profesionale: maximizați avantajele sfaturilor cu retenție redusă
Potriviți proprietățile lichidelor:
Lichide volatile (cum ar fi cloroform): Evitați să utilizați sfaturi obișnuite de retenție scăzută și folosiți sfaturi sigure cu solvent sau pipete externe cu piston proiectate pentru reactivi volatili.
Verificarea calibrării:
Cântăriți în mod regulat greutatea apei pure pipetate cu un echilibru analitic (1ml = 0,9982g la 20 ℃) ​​pentru a verifica dacă volumul real îndeplinește standardul.
Rezumatul punctelor cheie: Sfaturile cu retenție scăzută îmbunătățesc precizia prin reducerea pierderii eșantionului, dar dacă detaliile operației sunt ignorate, poate fi totuși contraproductiv. Instalarea standardizată, controlul vitezei, adaptarea la caracteristicile eșantionului și utilizarea strictă o singură dată stau la baza realizării experimentelor de înaltă repetabilitate.